量子点多色成像揭示乳腺癌标志物的原位分子表达谱
华盛顿大学X. H. Gao教授和埃默里大学R. M. O’Regan教授课题组,将525 nm, 565 nm, 605 nm, 655 nm 和705 nm发射波长的量子点,直接与HER2, ER, PR, EGFR 和 mTOR的一抗进行偶联。上述分子是临床重要的乳腺癌标志物,对于乳腺癌诊断、预后及个性化治疗具有重要意义。该课题组将量子点偶联抗体用于石蜡包埋组织切片染色,并进行了光谱定量分析,同时与IHC、Western blotting(WB)、FISH等方法进行比较。其研究结果显示,当蛋白表达水平较低时,量子点的定量光谱分析比传统IHC方法更精确,同时与WB方法相关性良好;FISH分析中,HER2基因扩增与基于量子点检测的HER2蛋白表达相关性良好,而且量子点偶联抗体可用于检测低水平的HER2蛋白表达。
总之,量子点偶联抗体可以很好地适用于肿瘤标志物的体外分子谱检测分析,其优势主要表现为:
①量子点的荧光亮度更强,灵敏度更高,可加强对低丰度靶点的检出;
②量子点荧光探针耐光漂白、不会出现光淬灭,荧光稳定性强,非常适用于定量分析和光谱分析。
③单一激发、多色成像,不同颜色荧光之间干扰小,适合多指标同时成像和定量分析。
石蜡组织切片的多肿瘤标志物原位分子表达谱分析
上图:不同发射波长(525/565/605/655 /705 nm)的量子点,分别与乳腺癌标志物HER2/ER/PR/EGFR/mTOR的一抗进行偶联,然后对乳腺癌病人的病理切片进行五色共染。
下图:针对上图染色结果进行光谱定量分析。
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